土壤溶解性有机碳组分连续分级测定方法

试验用样品采分别采集自林地、草地和农田地11个土壤，采集0~20cm表层土壤，土壤样品自然风干后，研磨，过100目筛备用。土壤类型为栗钙土，砂壤土和壤土，土壤理化指标如图所示。

TOC测定仪、恒温振荡器、高速离心机、水浴锅、pH计。

根据研究结果可见，土壤有机碳可以利用不同浸提液连续提取获得具有不同生态功能及活性的溶解性有机碳组分。

（1）水溶性有机碳：

干燥土壤样品过100目筛，取1~2g土壤样品置于离心管中，按固液质量比1：2，加入去离子水，在25℃下恒温振荡12h（200rpm），然后离心（5000rpm，15min），上清液过0.45μm 无菌微孔滤膜过滤，利用TOC以测定浸提液中碳含量，为水溶性有机碳，主要为一些低分子量糖类、氨基酸等，来源于植物凋落物渗透液、土壤微小动物和根系分泌物等，是土壤微生物分解的活性底物。

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（2）热水解有机碳：

残渣加入去离子水，放入水浴锅中100℃下，水浴2h，期间不断振荡（也可放置在水浴振荡器中），离心，过滤，利用TOC仪测定浸提液中碳含量，主要是土壤和凋落物中活性有机碳，即土壤团粒体表面吸附的有机碳，及受到干扰后易于降解的有机碳组分。

• Sparling G, Vojvodie- Vukovi M, Schipper L A. Hot- water soluble C as a simple measure of labile soil organic matter: The relationship with microbial biomass C [J]. J.Soil Biol & Biochem., 1998, 30: 1469-1472.

（3）酸水解有机碳：

残渣加入1mol·L^-1的盐酸，振荡2h，离心，过滤，调节浸提液pH值至7，利用TOC仪测定浸提液中碳含量，主要是土壤中蛋白质、核酸和多糖等大分子有机物[19,24]，即腐殖质中富里酸等成分。

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（4）碱水解有机碳：

残渣加入0.2mol·L^-1的NaOH，振荡6h，离心，过滤，调节浸提液pH值至7，利用TOC仪测定浸提液中碳含量，主要是土壤中稳定态腐殖质，即胡敏酸等成分[14,25]。土壤总有机碳含量减去四步提取的有机碳含量可获得土壤中难溶性有机碳含量，即土壤中的惰性有机碳，主要是木质素等难溶的、活性较低的有机碳组分。在浸提的过程中可以同时测定浸提液中氮含量，进而获得土壤中不同溶解态氮含量。

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试验数据统计与作图采用Excel软件，数据分析采用SPSS软件进行。